薄層原理和應用、可能用到的儀器耗材
薄層色譜(Thin LayerChromatography)常用TLC表示,又稱(chēng)薄層層析,屬于固-液吸附色譜。是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種微量、快速而簡(jiǎn)單的色譜法,它兼備了柱色譜和紙色譜的優(yōu)點(diǎn)。一方面適用于小量樣品(幾到幾十微克,甚至0.01μg)的分離;另一方面若在制作薄層板時(shí),把吸附層加厚,將樣品點(diǎn)成一條線(xiàn),則可分離多達500mg的樣品。因此又可用來(lái)精制樣品。故此法特別適用于揮發(fā)性較小或在較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物資。此外,在進(jìn)行化學(xué)反應時(shí),常利用薄層色譜觀(guān)察原料斑點(diǎn)的逐步消失來(lái)判斷反應是否完成。
薄層色譜是在被洗滌干凈的玻板(10×3cm左右)上均勻的涂一層吸附劑或支持劑,帶干燥、活化后將樣品溶液用管口平整的毛細管滴加于離薄層板一端約1cm處的起點(diǎn)線(xiàn)上,涼干或吹干后置薄層板于盛有展開(kāi)劑的展開(kāi)槽內,浸入深度為0.5cm。待展開(kāi)劑前沿離頂端約1cm附近時(shí),將色譜板取出,干燥后噴以顯色劑,或在紫外燈下顯色。記下原點(diǎn)至主斑點(diǎn)中心及展開(kāi)劑前沿的距離,計算比移值(Rf):
薄層色譜儀
薄層色譜法簡(jiǎn)稱(chēng)TLC,是在50年代從經(jīng)典柱色譜法和紙色譜法基礎上發(fā)展起來(lái)的一種色譜技術(shù)。60年代后,人們對薄層色譜法的標準化、規范化及擴大應用等方面進(jìn)行了許多工作,使該方法日趨成熟。
薄層色譜法工作的過(guò)程是這樣的:
首先將要分離的混合物點(diǎn)在用固定相均勻涂布的薄板的一端;
然后將薄板的這一端浸入流動(dòng)相,在流動(dòng)相浸濕薄板的過(guò)程中,樣品隨著(zhù)流動(dòng)相被展開(kāi),不同的組分隨流動(dòng)相以不同的速度向前移動(dòng),*終保留在薄板上的不同位置,從而達到分離的目的;
再用適當的方法對不同的組分進(jìn)行檢測,就可以定性或定量的對樣品作出分析。
此時(shí)的固定相被稱(chēng)為載體或吸附劑,而流動(dòng)相被稱(chēng)為展開(kāi)劑,被展開(kāi)的樣品叫做斑點(diǎn)。
由于通常用薄層色譜分析法進(jìn)行定量分析的過(guò)程中,薄層掃描儀是*為重要的,因此對它進(jìn)行略詳的介紹。
薄層掃描儀的基本結構及主要功能基本是相同的,每臺儀器都包括光源、分光器、檢測器、數據處理及信號輸出幾個(gè)部分。
典型的檢測方法是吸收檢測法,其基本測定原理為,用一束長(cháng)寬可以調節的一定波長(cháng)、一定強度的光照射到薄層斑點(diǎn)上進(jìn)行整個(gè)斑點(diǎn)或被斑點(diǎn)反射的光束,根據光束被斑點(diǎn)吸收后強度的變化來(lái)確定組分的含量。薄層色譜法的優(yōu)點(diǎn)特別適合我國國情,已成為許多實(shí)驗室不可缺少的分離手段。該方法在科研、教學(xué)、臨床、生產(chǎn)等各個(gè)領(lǐng)域中廣泛應用,分離對象也無(wú)所不包。
目前它正向聯(lián)用的方向發(fā)展,如薄層色譜--氣相色--質(zhì)譜聯(lián)用,或都薄層色譜--紅外光譜等的聯(lián)用。
醫藥工業(yè)
薄層色譜在醫藥工業(yè)中有很廣泛的應用,特別應用在***、中成藥的成分分析和合成**分析。
臨床醫學(xué)
在臨床醫學(xué)中,它主要用于對生物樣品和有毒的物質(zhì)進(jìn)行分析。
環(huán)境科學(xué)
薄層色譜可以用來(lái)進(jìn)行農藥及農藥殘留分析,或都對有毒金屬、多環(huán)芳烴進(jìn)行檢測。
食品化學(xué)
食品添加劑的**性問(wèn)題已經(jīng)越來(lái)越多的得到關(guān)注,用薄層色譜對食品添加劑進(jìn)行分析是一種簡(jiǎn)單有效的方法。
化學(xué)化工
薄層色譜在化學(xué)、化工方面也有很多應用,例如對高分子材料的助劑、填料等進(jìn)行分析。