HPLC柱溫控

在高效液相色譜儀中，需要高效液相色譜柱和一些檢測器來(lái)精 確控制工作環(huán)境的溫度，對色譜柱恒溫的要求非常高。溫度對溶劑的溶解度、HPLC 色譜柱的性能和流動(dòng)相的粘度都有影響。一般來(lái)說(shuō)，升高溫度可以增加溶質(zhì)在流動(dòng)相中的溶解度，從而降低其分配系數，但對分離選擇性影響不大；它還可以降低流動(dòng)相的粘度，從而改善傳質(zhì)過(guò)程，降低柱壓。但是，如果溫度過(guò)高，則容易在流動(dòng)相中造成氣泡。

HPLC柱溫變化

不同的探測器對溫度的敏感度不同。HPLC柱的不同工作溫度對保留時(shí)間和相對保留時(shí)間有影響。在凝膠色譜中使用軟填料時(shí)，溫度會(huì )引起填料結構的變化，從而影響分離。但是，如果使用硬填料，效果并不顯著(zhù)。

高效液相色譜柱的保護和再生

在色譜分析系統中，高效液相色譜柱主要起到分離和檢測物質(zhì)的作用，如色譜系統的心臟，也是易損產(chǎn)品。一些保留值較小的物質(zhì)，如鹽類(lèi)，更容易被沖入色譜柱，而另一些保留值較強的物質(zhì)，流動(dòng)相溶液不足以洗脫這些物質(zhì)。

在多次取樣后，這些吸附在柱子表面的物質(zhì)通常會(huì )積聚在柱頭中。當吸附的樣品組分積累到一定程度時(shí)，就會(huì )形成新的固定相，改變分離機理，使樣品保留時(shí)間發(fā)生波動(dòng)，出現拖尾現象。

為延長(cháng)色譜柱的使用壽命，曾有人指出應在分析柱前接小保護柱。作用是收集和阻擋來(lái)自進(jìn)樣器的機械和化學(xué)雜質(zhì)，以保護和延長(cháng)分析柱的使用壽命。

因此，選擇保護柱的原則是在滿(mǎn)足分離要求的前提下，盡可能選擇分離樣品保留率低的短保護柱。