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新聞動(dòng)態(tài)

如何檢測寨卡(Zika)病毒

臨床醫師和流行病學(xué)家希望能在出生前幾個(gè)月里就確定嬰兒是否感染了寨卡病毒,為此美國**控制與預防中心CDC的科學(xué)家們進(jìn)行了一種稱(chēng)為蝕斑減少中和試驗(Plaque Reduction Neutralization Test) 的檢測,這種方法是檢測血清中和抗體的一種敏感性較高的方法,能檢測之前的感染。


2014年以來(lái)美洲多個(gè)國家相繼發(fā)生寨卡病毒(Zika)感染病例,世界衛生組織近日警告,寨卡病毒正呈現“暴發(fā)式傳播”,預計美洲地區將有至多400萬(wàn)人感染這種病毒。截至目前,中國大陸尚未發(fā)現病例,但**預防控制中心指出我國仍存在病例輸入風(fēng)險。


目前關(guān)于這種病毒傳播的疑問(wèn)不少,比如懷孕期間感染與造成嬰兒小頭畸形之間的關(guān)聯(lián),但由于目前診斷方法的局限性,還很難給出一個(gè)答案來(lái)。一組研究人員正在攻關(guān),希望能以*快的速度研發(fā)出**試劑,檢測是否感染Zika病毒。


來(lái)自德州大學(xué)加爾維斯頓醫學(xué)分校的Nikos Vasilakis表示,“我們正盡全力盡快給臨床醫師們一些答案?!?/span>


目前,檢測寨卡病毒的標準檢測方法是對樣本進(jìn)行PCR,分析樣本中的病毒RNA探針是否存在,雖然這種方法能很好的檢測到病毒,但是病原體的RNA很快就會(huì )被降解掉?!霸诨颊甙褬悠匪腿肱R床時(shí),病毒也許已經(jīng)消失,或者只能抓住它的尾巴了,這超過(guò)了檢測時(shí)間限制,”Vasilakis說(shuō)。


臨床醫師和流行病學(xué)家希望能在出生前幾個(gè)月里就確定嬰兒是否感染了寨卡病毒,為此美國**控制與預防中心CDC的科學(xué)家們進(jìn)行了一種稱(chēng)為蝕斑減少中和試驗(Plaque Reduction Neutralization Test) 的檢測,這種方法是檢測血清中和抗體的一種敏感性較高的方法,能檢測之前的感染。


從原理上說(shuō),這一檢測方法以使蝕斑數減少50%的血清稀釋度作為其中的效價(jià)。試驗使用定量的病毒(100PFU)與不同稀釋度的等量血清混合后感作, 接種預先準備好的單層細胞,再覆蓋上營(yíng)養瓊脂置37度二氧化碳培養箱培養,數天后分別統計蝕斑數,用Karber法計算該血清的蝕斑中和效價(jià)。


患者的血清中混有病毒,幾天時(shí)間里研究人員觀(guān)察病毒是否會(huì )感染培養基,如果沒(méi)有,那么病毒就已經(jīng)被血清中的抗體中和了,這表明患者曾經(jīng)接觸過(guò)寨卡病毒。


CDC甲類(lèi)病毒實(shí)驗室主任Ann Powers表示,使用這種方法的問(wèn)題在于“你必須有活體病毒,和合適**的環(huán)境,”這意味著(zhù)只有少數幾個(gè)實(shí)驗室能進(jìn)行這種試驗。


其它更加方便的血清學(xué)測試也能檢測特定病原體中的抗體,但是對于寨卡病毒來(lái)說(shuō),很難判斷患者攜帶的黃病毒是登革熱病毒,寨卡病毒還是其它病毒?!岸艺ú《境鋈サ膮^域也正是登革熱出現的地區,”來(lái)自華盛頓大學(xué)圣路易斯分校的**學(xué)家Mike Diamond說(shuō)。


Vasilakis 正在嘗試ELISA方法,也就是檢測體液中微量物質(zhì)的固相**測定的方法,這種方法利用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接,然后通過(guò)酶與底物產(chǎn)生顏色反應,用于定量測定,可以在感染后幾個(gè)星期內檢測到Zika病毒。雖然這也有可能會(huì )與其它感染發(fā)生一定程度的交叉反應,但如果Zika病毒特異性抗體濃度高就能指示出近期發(fā)生的Zika病毒感染,Vasilakis說(shuō)。


Vasilakis預計在未來(lái)幾周內,Diamond研究組就會(huì )有結果,研發(fā)出一種針對Zika病毒的單克隆抗體檢測方法,這能與ELISA方法結合,檢測發(fā)生過(guò)的感染,“我們很早就開(kāi)展了這項研究,這個(gè)月就能得到結果,”Diamond說(shuō),“初步結果表明我們的一些抗體能特異性識別Zika病毒?!?/span>


不過(guò)即使Diamond研究組的抗體能特異性檢測Zika病毒,他們也需要一些時(shí)間來(lái)建立診斷方法,“這可能還需要幾個(gè)月的時(shí)間?!?/span>


與此同時(shí),一些生物公司也開(kāi)始銷(xiāo)售Zika血清學(xué)檢測,比如MyBioSource 公司已經(jīng)有售一種針對Zika的IgM ELISA檢測,來(lái)自加拿大的Biocan 公司也在出售一種檢測IgM和IgG抗體(后者比前者在感染后提升水平更高)的扎手指檢測方法,能在5到10分鐘得到結果。


Diamond表示他們還未接觸任何商業(yè)產(chǎn)品,Biocan目前還未給出有效數據,但是其銷(xiāo)售部總經(jīng)理Bhavjit Jauhar表示他們已經(jīng)將實(shí)驗室和現場(chǎng)檢測結果呈遞給巴西監管當局,“我們過(guò)去幾年間一直致力于Zika病毒的研究,因為我們認為這種疫情會(huì )暴發(fā)?!?/span>

來(lái)源:儀器信息網(wǎng)



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