氨基(NH2)柱使用一段時(shí)間后，是否遇到柱效降低、柱壓升高？或干擾峰異常、保留時(shí)間漂移？或某些色譜下方法無(wú)法重現條件？還是分辨率、塔板、拖尾因子達不到檢測要求？NH2柱的獨特性給我們帶來(lái)了很多麻煩，所以今天我們就來(lái)聊聊NH2柱。

NH2柱的鍵合官能團是氨基丙基，比傳統的C18、C8和C4更容易水解。因此，在使用NH2柱之前，我們必須有一個(gè)心理準備，NH2柱的壽命比常規柱要短很多。

NH2 柱可用作正相或反相。由于兩相中使用的溶劑不混溶，因此需要使用異丙醇進(jìn)行過(guò)渡以在正相和反相之間切換。下面分別討論反相和正相NH2柱的使用和維護。

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反相

如果流動(dòng)相中不含任何酸、堿或鹽，則樣品檢測后應用 100% 乙腈沖洗并保存 NH2 柱。如果流動(dòng)相含有酸、堿或鹽類(lèi)，先用 60% 乙腈沖洗色譜柱 40 分鐘，然后用 100% 乙腈沖洗并儲存。

反相使用時(shí)，注意流動(dòng)相的pH范圍。pH值越低，水解越容易。理想的 pH 值范圍是 3-7。此外，流動(dòng)相中水的比例越高，水解越容易。

使用后，建議將色譜柱沖洗并存放在純有機相中，以獲得良好的保存效果并延長(cháng)使用壽命。另外，如果色譜柱出現高壓、峰形異常、柱效低或分離度低等異常情況，可先用過(guò)渡流動(dòng)相沖掉鹽分，然后按如下方式?jīng)_刷：100%乙腈→100%甲醇→100%異丙醇→ 100% 乙腈以分析流速每步 30 分鐘，而異丙醇由于其高粘度需要較低的流速。

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正常階段

色譜柱應用100%正己烷沖洗，并用正己烷/異丙醇 (90/10)儲存。

在正相模式下，固定相的含水量是影響選擇性的關(guān)鍵參數，而流動(dòng)相的含水量影響保留時(shí)間和分離度，因此當固定相和固定相的含水量之間時(shí)，保留時(shí)間很容易發(fā)生偏移。流動(dòng)相變化。建議去除氨基柱中的水。

建議：

1、去除固定相中的水：
      用30倍柱體積的含有 2.5% 二甲氧基丙烷和 2.5% 冰醋酸的正己烷沖洗色譜柱。

  2、使用控制水含量的流動(dòng)相

半飽和流動(dòng)相法：將無(wú)水非極性流動(dòng)相分成兩半。 一半加入一定量的水，然后混合攪拌約1小時(shí)。 靜態(tài)分層后，除去多余的水相，將兩半重新混合在一起形成“半飽和”流動(dòng)相。

如果色譜柱出現高壓、峰形異常、柱效低或分離度低等異常情況，請按以下步驟沖洗色譜柱：100% 異丙醇 → 100% 甲醇 → 100% 異丙醇，分析流速每步 40 分鐘，而異丙醇由于其高粘度，需要較低的流速。